Abstract
EB病毒感染已被證實和許多人類細胞癌化有關，其中包括了B細胞淋巴癌和鼻咽癌。在EB病毒感染過程中，包含了潛伏和細胞溶解的過程。然而，從潛伏期過渡至細胞溶解期，病毒基因的調控表現並不清楚。第一部分的研究中，將使用TPA和HU兩種藥品加入EB病毒持續感染的B95-8細胞，用以分析EB病毒整體基因表現的情況。在加入TPA四十八小時後，EB病毒在細胞中的複製速率約增加二點五倍；而加入HU的情況，則降低EB病毒的複製速率達三分之二。大部分的EB病毒基因在細胞中的表現量均低於□型肌動蛋白。在加入TPA後，多數的病毒基因表現都會增加；相反的，當加入核甘酸合成抑制劑HU後，多數屬於細胞溶解期表現的基因會呈現明顯的抑制情況。在這部份的研究中，定量即時PCR技術的確是個可以用來偵測在藥物影響下EB病毒的基因表現。 在鼻咽癌切片檢查中，經常可以發現EB病毒第二A型潛伏膜蛋白(LMP2A)的存在。最近由鼻咽癌切片檢體所獲的cDNA微陣列研究中發現，第二A型潛伏膜蛋白與細胞中的尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素(UDP-glucose dehydrogease, UGDH)基因具有很高的相關性。尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素催化尿嘧啶雙磷酸葡萄糖(UDP-glucose)氧化反應變成尿嘧啶雙磷酸葡萄糖醛酸(UDP-glucuronic acid)，是構成細胞間質的前驅物。過量的細胞間質與眾多的細胞行為有關，其中包括了細胞的移行現象，因此尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素在研究癌細胞轉移上可能是個很好的研究對象。第二部份的研究，延續這個發現並證實：在EB病毒第二A型潛伏膜蛋白過量表現的HEK293細胞中，尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素基因其轉錄、轉譯功能及酵素活性都呈現增加情形，而細胞中的葡萄氨聚糖(glycoaminoglycans)含量也隨之增加。EB病毒第二A型潛伏膜蛋白所調控的尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素基因的啟動子區域，是位於其上游630 □ 486 bp，在這個區域的Sp1位點發生突變後，將減低EB病毒第二A型潛伏膜蛋白對其調控的影響。同時，加入Sp1的特定抑制劑與siRNA均可抑制由EB病毒第二A型潛伏膜蛋白所誘導的細胞移行現象。進一步尋找EB病毒第二A型潛伏膜蛋白調控尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素基因表現的訊息調控路徑，在加入特定抑制劑後，發現PI3K/Akt和ERK參與其中。這部份實驗提供了EB病毒第二A型潛伏膜蛋白調控尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素基因表現可能的分子調控機制。 在第三個研究部分，以siRNA降低人類腸癌細胞HCT-8中的尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素，發現在RNA和蛋白質表現上均有明顯的抑制。同時，在單層細胞培養中，可測量到葡萄氨聚糖的產量降低；在三維細胞培養中，延緩細胞球小體(spheroid)的培養時間，亦可破壞癌細胞的移行能力。因此，尿嘧啶雙磷酸葡萄糖去氫酵素或許亦可作為治療腸癌上的標的。