Abstract
腸胃道組織具有特殊的立體微結構和血管、神經網絡來消化食物及吸收養分以維持生理機能。在使用光學顯微鏡觀察腸胃道組織時,組織的不透明性往往會阻礙組織內部清晰影像之取得。一般解決此問題的方法是使用切片機將腸胃道組織切成薄片樣本,使光能夠穿透薄片組織再使用光學顯微鏡觀察樣本。然而使用切片機進行組織切片,會造成組織樣本的扭曲變形與切割破壞,導致無法取得精確的樣本影像並且無法完整呈現組織之立體結構。因此我們發展出穿透式共軛焦顯微鏡技術來截取老鼠腸胃道組織之微結構、血管及神經網絡之三維影像。 我們使用三種染色技術來標定組織:(1)螢光染色-標定細胞核和細胞膜以取得腸胃道組織的微結構 (2)血管灌流技術-標定血管網絡 (3)免疫螢光染色-標定神經網絡。 接著將螢光染色後的組織浸在組織澄清液中,使組織變透明且增加光子的穿透度以取得高解析度的精確影像。最後再使用軟體將連續二維影像重組成三維立體影像來觀察腸胃道組織中微結構、血管和神經網絡之空間關係。在此論文中,我們觀察了腸道發炎小鼠之大腸結構變化以及轉殖基因螢光鼠其腸道組織的螢光表現,並且同時取得血管和神經網絡在腸道組織中之影像。 我們將『組織透明技術』與『共軛焦顯微鏡技術』結合,針對老鼠的腸胃道組織進行非破壞性的連續光學切片影像截取並且重組成立體三維影像,提供了完整且準確的組織影像來幫助研究腸胃道組織之生理機能和致病機制。