Abstract
蛋白質鷹架為一對氨基酸置換具有高耐受度的胜肽骨架，本研究針對具有cysteine-stabilized □□ motif（CS□□ motif）之蛋白質鷹架進行系統性的耐受度研究。具有此一結構的蛋白質族群，其氨基酸序列相似度低，但可摺疊成相似度極高的立體構造，一般認為適合應用於蛋白質工程改質研究。綠豆第一型防禦素為一具有CSab motif的蛋白質，本研究中應用此一蛋白質做為模型，探討CSab motif對於氨基酸置換之耐受性，利用系統性丙氨酸置換方法，搜索對CS□□ motif之結構穩定性及生化功能具有決定性影響的氨基酸位置。本研究以核苷酸聚合酶鏈鎖反應方法對模型蛋進行點突變，對各突變蛋白進行旋光光譜、內生性螢光光譜及化學變性之測量，以酵素抑制能力作為生化指標。結果顯示，雖然部份突變完全失去酵素抑制能力，但所有突變蛋白質的結構穩定性並未有顯著變化。本研究為第一個對CSab motif進行完整的丙氨酸置換研究，所得之結果對CSab motif之蛋白質工程研究具有高度的應用參考價值。