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水稻類金屬硫蛋白基因在逆境中之表現與其啟動子活性之分析
Dissertation

水稻類金屬硫蛋白基因在逆境中之表現與其啟動子活性之分析

謝幸媚
Doctor of Philosophy (PHD), 國立清華大學, 生命科學系
1995

Abstract

類金屬硫蛋白 逆境 北方雜交試驗 Metallothionein-like proteins stress Northern hybridization
本論文以水稻為材料,探討植物類金屬硫蛋白基因的存在,於逆境中的表 現情形及其調控的機制。由水稻分離出兩個類金屬硫蛋白基因的 cDNA, OsMT-1 ( Oryza sativa metallothionein-like gene-1 ) 及 OsMT-2 ( Oryza sativa metallothionein-like gene-2 ),依其可能傳譯 ( translation ) 出的蛋白序列推測,分別屬於第一及第二型 ( type 1 and 2 ) 的類金屬硫蛋白基因 ( metallothionein-like gene )。北方雜 交試驗 ( Northern hybridization ) 結果指出,OsMT-1 可受逆境誘發 ,如熱休克、過量銅、養份缺乏(缺糖)及老化等,但生長激素 ABA ( abscisic acid ) 則抑制其表現。OsMT-2 雖亦受熱休克及養份缺乏所誘 發,但銅離子反而稍為抑制其表現。由此結果作比較,推測逆境影響 OsMT-1 是經由金屬或直接作用在5`-端調控區的途徑,而對OsMt-2是直接 經由5`-端調控區或非金屬性的間接調控。本論文進一步由基因組基因庫 ( genomic library ) 篩選得 OsMT-1 的完整基因序列 rgMT-1 ( rice genomic metallohionein-like gene-1 )。由其5`-端啟動子區 ( promoter ) 及上游核甘酸序列的分析,得知其中含兩組典型的 TATA 盒 及多個擬基因調節序列。經 GUS (β-glucuronidase )報導基因系統的測 試,結果顯示,啟動子的活性位於 -73 到 -36 之間,而內插子 ( intron ) 的存在,可增強基因的表現。

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