Abstract
禽流感病毒對全世界的家禽產業有巨大的威脅，因此需要有效的疫苗來防止大流行。現今的禽流感疫苗是由雞蛋培養禽流感病毒，再經由去活化作用而成，然而面對快速傳布的流感疫情時，以雞蛋生產疫苗不具有時效性，而且需在安全等級高的場所生產。桿狀病毒的宿主為昆蟲細胞，但已證實可在哺乳細胞內表現外源基因，具有高度安全性及有效的基因傳遞能力。因此，本研究希望開發桿狀病毒作為新型禽流感的疫苗載體。我們先前已成功將禽流感病毒的主要抗原血球凝集素(hemagglutinin, HA)，表現在桿狀病毒的套膜上(Bac-HA64)，可引發有效的免疫反應。在此研究中，我們另外開發了兩種桿狀病毒，分別可在宿主內表現HA (Bac-CHA)以及同時在套膜上及宿主內表現HA (Bac-CHA/HA64)。我們比較三種型式桿狀病毒刺激不同的免疫反應，包括了體液免疫反應(抗體效價及血球凝集抑制效價)，細胞性免疫反應(IFN-□, IL-4細胞激素及CD8+ T細胞)。我們發現Bac-CHA及Bac-CHA/HA64以肌肉注射時，可引發最好的體液性及細胞性免疫反應，而Bac-CHA/HA64在不同的免疫途徑可引發較好或同樣的免疫反應，具有作為未來開發為流感疫苗的潛力。為了增強桿狀病毒作為疫苗的免疫效果，我們進一步建構三株桿狀病毒: Bac-HAW在HA基因後加上WPRE序列，目的為增強及延長HA抗原的表現；Bac-HAMW表現HA-MITD融合蛋白，希望增進HA蛋白被處理以及呈獻的效率；Bac-C12W則是可以表現IL-12細胞激素，希望額外表現的IL-12有幫助免疫反應的佐劑作用。我們發現加入WPRE序列，以及表現HA-MITD的融合蛋白，皆可以促進抗HA的體液性及細胞性免疫反應，但是共同注射Bac-C12W卻沒有任何效果。本研究是第一個系統性地比較不同形式的桿狀病毒免疫效果，也是第一個採用新穎的載體設計幫助桿狀病毒作為疫苗的效果，對於未來推廣桿狀病毒作為禽流感疫苗載體有重大的幫助。