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豬腦神經突觸後緻密體9OkDa蛋白質的研究
Thesis

豬腦神經突觸後緻密體9OkDa蛋白質的研究

吳怡宓
Masters, National Tsing Hua University
1991

Abstract

豬腦神經蛋白質後緻密體
中樞神經系統的神經突觸後緻密體(postsynaptic density, PSD) 是一位於後突觸膜下方的緊密的蛋白質構造。生化分析結果指出,PSD 中含有細胞骨架蛋白、神經傳導物質受器、蛋白激□及醣蛋白等。有些間接的實驗證據則指出,PSD 可能直接或間接的調節神經衝動的傳導,或參與腦部學習和記憶之過程。但至目前為止,PSD 的蛋白質組成和功能仍未研究清楚。本實驗利用免疫及分子選殖的方法由PSD個別蛋白質的研究著手,希望藉由對PSD 蛋白質組成的了解推測PSD 可能參與之腦部功能。豬腦的神經突觸接合區(synaptic junction, SJ) 蛋白質為研究的啟始材料,其中包含90﹪以上之PSD 。以SDS-聚丙烯膠體電泳分離出的90kDa SJ蛋白質注射兔子後,得到一anti-90k抗體。以此抗血清篩選豬腦反訊息DNA 集合庫時,找到一個長1,568bp 之反訊息DNA,gt11.90.2 。定出gt11.90.2 之完整序列後,並未在基因庫中找到相同或可能之同源基因,可見90kDa 蛋白質尚未被仔細研究過。分析gt11.90.2 反訊息DNA 之序列發現其中並無起始譯碼、停止譯碼或poly(A) 尾部存在,而唯一可能的開放譯讀區所合成之蛋白質只有56.7kDa,小於原始抗原之90kDa,所以gt11.90.2 並不是一個完整長度之反訊息DNA 。同時,利用表現載體表現此反訊息DNA 的蛋白質,再用以注射老鼠後,得到的抗血清可以專一性的辨識SJ中之90kDa 蛋白質,此與原始得自兔子的抗血清所辨識的抗原相同,由此證實gt11.90.2 確實攜帶部分90kDa 蛋白質的遺傳訊息。雖然目前無法由此不完整的反訊息DNA得知90kDa 蛋白質的結構及功能,但實驗過程累積的各類抗體及DNA 有助於90kDa蛋白質的進一步研究。

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