Abstract
攜鈣素在細胞體內能以高親合性;高專一性的特質與鈣離子結合後可活化 細胞體內多種酵素.而這些酵素結合部位的胺基酸序列間不具高度的相似 性,但經由螺旋輪示圖的排列中多俱有形成雙面性 (amphipathic)螺旋結 構的特性.此外,藉由旋光儀及核磁共振光譜的實驗中可發現這些peptide 在與攜鈣素結合時均呈現螺旋的構形我們選擇二條攜鈣素結合蛋白結合部 位的序列(M5;CaD),並分別在序列的N-端加上Capping Box;其具有提高螺 旋結構的特質.藉由旋光儀的觀察可發現在水溶液中有無Capping Box的 peptide 均無明顯的二級結構,而在 30%TFE (V/V)的溶液中,具有 Capping Box的peptide (NcapM5 ; NcapCaD) 其螺旋率明顯的比未具 Capping Box 的peptide (M5 ; CaD) 高出許多.顯示出peptide的N-端外 加 Capping Box可讓該peptide具有螺旋傾向的特性.而在隨後的核磁共振 光譜的實驗中,亦可輔助證實NcapM5,NcapCaD 其為螺旋結構以螢光光譜 儀對各peptide的觀察均發現有藍位移現象,顯示其色胺酸已處於非極性環 境中.而在異向性及競爭性抑制的特性上,顯示出Capping Box 在CaD對攜 鈣素的結合有減低結合的作用,並且其上的色胺酸改變原來與攜鈣素作用 的位向.而Capping Box在 M5對攜鈣素的結合則無明顯的影響,但形成複合 體後該peptide 的自由運轉度明顯的降低.推測可能由Capping Box加強M5 螺旋結構傾向後,在被攜鈣素誘導形成螺旋結構後造成其色胺酸加強對攜 鈣素疏水性側鏈的作用所導致.