Abstract
人類轉移至頸部淋巴結之上皮癌細胞株UP-LN1在體外培養環境會分為貼盤型(AD)與漂浮型(AID)兩細胞群。相較於AD細胞，AID細胞在表面抗原分析、動物實驗上皆顯示具有幹細胞之特性與腫瘤生成能力，而AID細胞是否也較具有免疫耐受的能力是本篇所要探討的。首先對AD與AID細胞之免疫表現形作分析，AID細胞表面具有第一型主要組織相容性抗原HLA-A, -B, -C下調的現象，並且有大約35%細胞群表現非典型第一型主要組織相容性抗原HLA-E, -F, -G，並且分泌較多的分泌型MICA (sMICA)。在NK細胞毒殺方面，AID細胞遭受毒殺比例低於AD細胞約35%，而AID對NK細胞的毒殺耐受性可由HLA-G抗體結合、中和上清液中sMICA或利用trypsin移除細胞表面HLA-E, -F, -G，皆可回復NK對AID細胞之毒殺能力。值得注意的是trypsin處理細胞後，AID細胞表面之HLA-A, -B, -C會有明顯上調現象，因此推測有一未知蛋白結合於這些HLA分子上。實驗上利用免疫沉澱、銀離子染色、配合LC/MS/MS質譜分析、Western blot與免疫螢光染色，找到此未知蛋白可能是cytokeratin 8(CK8)，在質譜分析也找到CK8共同結合蛋白，CK18與CK19。利用重組DNA將CK8/18或CK8/19共同表現於HEK293細胞能下調表面細胞表面HLA class I分子。目前許多研究發現癌細胞表面有CK8之表現，其可以影響細胞外基質的分解，幫助惡性轉移。綜合本研究的發現，AID細胞具有多重免疫逃避機制，包括同時表現HLA-E, -F, -G與分泌較多sMICA以逃避NK細胞攻擊，及藉著CK8遮蔽HLA-A, -B, -C分子，以逃避毒殺型T細胞之辨識並促進惡性轉移。AID細胞CK8是如何表現於細胞表面與HLA-A, -B, -C分子結合是未來研究的一個方向。