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EDWARDSIELLA TARDA 細胞膜酯多醣及蛋白質之分析及其重建
Thesis

EDWARDSIELLA TARDA 細胞膜酯多醣及蛋白質之分析及其重建

李右軍
Masters, National Tsing Hua University
1987

Abstract

脂多醣細胞膜革蘭氏陰性蔗糖密度梯度離心腸內細菌科氧化醣類 EDWARDSIELLA-TARDALIPO-POLYSACCHARIDSGRAM-NEGATIVESUCROSE-GRADIENTCENTRIFUGATIONENTEROBACTERIACEAEOXY-SUGARS
Edwardsiella tarda為一革蘭氏陰性(Gram-egative)魚病菌,主要存在於動物之消化道中,有時亦可在人類胃腸道中發現。革蘭氏陰性菌外被構造分為三層:內膜、細胞壁、外膜。利用蔗糖密度梯度離心( Sucrose gradientcentrifugation )可分離內外膜。觀察Edwardsiella tarda細胞膜蛋白質電泳染色膠片,有典型腸內細菌科(Enterobacteriaceae)蛋白質,具Porin功能。在缺鐵情形下生長,一55KD蛋白質被抑制,65KD蛋白質被引發,這些蛋白質和鐵吸收有關。內膜蛋白質組成較外膜複雜,有較多高分子量蛋白質。整個外膜氧化醣類(Oxy-sugars)分布約50%位於醣蛋白上,外膜醣蛋白多於內膜。腸內病原菌之內毒素為菌體瓦解之後所放出之脂多醣(Lipopolysaccharide),脂多醣幾乎構成外膜之外半層。Edwardsiellatrada 脂多醣之脂質A 部分以甲基支鏈化β-Hdroxymyristic acid(14:0,OH)為主要脂肪酸,其次為Myristic acid (14:0)及Palmitic acid (16:0)。外膜氧化醣類總量30%位於脂多醣,18%位於其他醣脂質(Glycolioid)。磷總量48%位於脂多醣,41%位於磷脂質上。由於脂多醣可當作抗原生產單株抗體疫苗之遠景,因此嘗試以重建達純化目的。由外膜重建得兩種不同磷脂:蛋白質比之胞膜。由脂多醣和PE(Phosphatidylethanolam-ine ):PG(Phosphatidyglycerol )=4.83:1之脂質重建得到三種密度不同之胞膜,其中比重最重之一種有特異性脂多醣分子被濃縮,顯示此特異脂多醣分子與PE或PG有較大親和力。

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