Abstract
Flavobacterium sp.為一革蘭氏陰性(Gram-negative )牛蛙病原菌,引起牛蛙神經症狀及敗血症,可由病蛙的腦,脊髓,內臟及脂肪體中分難得到。利用溶菌□分解細胞壁,並以French pressure cell將細胞打破後以蔗糖梯度難心(Isopyenic sucro-se density gradient centrifugarion)將內外膜分難可得到四種不同密度的胞膜:L1(ρ=1.14),L2(ρ=1.16),M(ρ=1.19),H(ρ=1.22)。觀查細胞膜蛋白質電泳染色膠片,發現內外膜蛋白質組成差異極大,內膜蛋白質組成遠比外膜複雜。外膜有一主要的蛋白質,且僅存於外膜中,分子量為61KD。胞膜負染色後,以電子顯徵鏡觀察,內膜直徑較小,而外膜表面有類似結晶狀,表層蛋白質(Surface-layer protein )的規則棑列,寬度為35A至45A。此61KD蛋白質可能為表層蛋白質的單元體。Flavobacterium sp.在缺鐵的環境下生長,外膜會誘導一38KD蛋白質的產生,此蛋白質與鐵的吸收有關。菌體瓦解後釋放出脂多醣(內毒素),脂多醣已經由Flavobacterium sp.分難得到。以SDS-PAGE電泳後經銀染呈色,發現脂多醣短醣鏈者占大多數,以不帶o-抗原暫含量最高。脂質A為脂多醣毒性所在,分析脂質A的脂肪鏈(Acyl chain)種類包括(1)不同碳鏈長度的飽合脂肪酸(2)長鏈醇類(3)具支鏈的脂肪酸(4)一系列β-hydroxy fatty acid的衍生物。其中以12碳醇(1-dodecanol )含量最多佔18.89%,而Myristic acid (14:0),Palmitic acid (16:0),及Stearic acid(18:0)三者的含量相近,都接近10%。分析脂多醣的化學組成,得到脂多醣中胺糖:七碳糖:磷:脂肪酸的莫耳數比為11:1:3:6。其中不含去氧八碳酮糖(KDO ),而此分子對許多種類細菌,維持其外膜功能的完整是必需的。以膠體過濾法,可將不同分子量的脂多醣分成兩區。分析不同fraction的脂多醣,其脂肪鏈組成於種類及比例上皆有差異。