Abstract
Flavobavterium ranacida,一種革蘭氏陰性菌,為台灣養殖牛蛙中最主要 的病原菌.其胞膜的主要磷脂質成份是 phosphatidylethanolamine (PE) 以及 lysophosphatidylethanolamine(lysoPE),分別佔磷脂質的 80.99%及19%,且磷脂質的長鏈脂肪酸主要以 13-methyl myristate 佔最 多數.從磁共振光譜及氣相色層分析的結果得知, lysoPE 的長鏈中 88.95 % 屬於 13-methyl myristate.由於 F.ranacida 菌膜磷脂質的長 鏈脂肪酸末端,具有特殊的甲基化結構,於是我們純化 F.ranacida 菌膜 的 PE,並配合合成的 myristate. palmitate.13-methyl myristate 以 及 15-methyl palmitate 來探討這些甲基化的脂肪酸對血小板生理功能 的影響.我們發現,F.ranacida 菌膜之PE(108 uM),對膠濾形血小板只有形 態的改變,對生理功能並沒有明顯的效應.而這四種脂肪酸會造成血小板不 同的形態變化,且帶有甲基的脂肪酸:13-methyl myristate及15-methyl palmitate 於高濃度時(>108 uM)能夠促使血小板完全溶解.依據 Bilayer hypothesis,及從掃描式電子顯微鏡的追蹤觀察,發現帶有甲基分 支的脂肪酸在血小板內外膜 flip-flop 的速度比直鏈脂肪快.此外,四種 脂肪酸中,也以 13-methyl mtristate 及 15-methyl palmitate 能夠有 效地抑制血小板刺激劑 U46619.ADP-fibrinogen.phorbol ester 以及 collagen 對血小板的凝集反應.而對於另一種血小板刺激劑,thrombin,則 只有 15-methyl palmitate 能夠明顯地產生抑制.由以上的結果顯示,脂 肪酸末端的甲基結構以及碳鏈的長度,對於膠濾形血小板生理反應的影響, 將扮演更重要的角色 .同時,對於F.ranacida菌造成牛蛙致病的原因,也提 供了分子層面的解釋.