Abstract
HZ-1核角病毒是研究 DNA大型病毒持續性感染的最好模式之一。這個病毒含有228.3kb 圓環雙股的DNA 基因體。此病毒在急性感染及持續性感染時的轉錄情況已經被確定出。令人驚訝的是雖然在急性感染時,約有 100個基因被轉錄,但是在持續性感染卻只有一個基因被轉錄。這個唯一在持續性感染時期被轉錄的基因被命名為persisten-cy associated gene (PAG),它所製造出來的 RNA則命名為persistency associatedtranscript (PAT)。它在病毒感染後的最早期就表現出來,並且持續地被轉錄,在持續感染三年後,PAG 仍是唯一被轉錄的基因。這個基因已被我選殖(clone) 並且接到Bluescript載體上,形成一個命名為pHzE-M的質體,並且用Kpnl及EcoRI 二種限制 把DNA 繼分為六段,分別選殖到Bluescript載體上。又為了更進一步確定 PAG的基因序列,我再用限制 ExoⅢ把pHZE-M 及它的次克隆(subclone)連續分解成長短重疊的選殖,然後用T7DNA 聚合 將包含PAG 的 4KbDNA 的序列一一解讀。所得的實驗資料再輸入電腦做第三base的分析及蛋白質的解讀分析,發現PAG 並無明顯的蛋白質開讀序列,只有一小段 219個氮基(ORF219)可能有製造蛋白質。意即它很可能不製作蛋白質,即然PAG 是潛伏感染唯一表現的基因,它和潛伏期感染應有某種關連,我的實驗指出這種關連有可能是由 RNA來執行。並且,我亦把ORF219的序列輸到基因資料庫去做比對,發現蘇力菌內毒素與它類似,這有可能具有某種特殊的意義。另外我用核糖核酸 A 保護(RNase A protection)的方法來確實定出 PAT兩端的位置。如此,從DNA 序列分析及 PAT的定位已讓我找到保進子的位置,而此促進子的確認將是了解病毒由急性變潛伏感染重要的一步。至於將來重要的工作則是找出為何在潛伏感染時其他促進子會被抑制住而 PAG的不會,以及PAT 若不轉錄蛋白質的話,RNA 如何來執行由急性感染轉變成潛伏感染的功能。