Abstract
第一型綠豆防禦素(VrD1)與第二型綠豆防禦素(VrD2)被歸類成植物防禦素。植物防禦素是一種小分子胜肽，會形成四對雙硫鍵來穩定結構。主要的作用是做為植物免疫的第一道防線，三級結構與其他生物體內的防禦素非常相似，對於植物及動物細胞不會產生毒性。先前的研究將VrD1第三個loop的序列置換到VrD2的第三個loop上，創造了一個新的嵌合蛋白質VrD2c能帶有抑制昆蟲澱粉酶的功能。基於這樣的研究成果，我們希望利用蛋白質工程的技術，給予VrD2c第二項功能。 在本次的研究，將胰蛋白抑制劑的序列轉到VrD2c的Loop 1上做為第二項功能，同時也計畫將RGD序列轉移到VrD2的loop1及loop 2上，期望藉由與integrin高度結合，成為治療血小板疾病的蛋白質藥物。我們利用圓二色光譜儀觀察到變異蛋白均展現高度的穩定性，新的嵌合蛋白同時帶有抑制胰蛋白酶及澱粉酶的功能。此外，我們計畫利用血小板聚集試驗，確認帶有RGD序列的VrD2衍生物具抑制血小板凝集的功能。就目前結果來看，VrD2是一個適合用來進行蛋白質工程的支架蛋白，我們可以將VrD2的loop置換成不同的序列，以期能開發為帶有特殊性質的新蛋白。