Abstract
在本篇論文中，利用一連串的蛋白質磷酸化作用點分析技術-雙向薄層色 層分析， 磷酸胺基酸種類分析愛德曼降階分析高效能液態層析分析和胺 基酸定序分析來定出胰島素第二訊號激脢 FA/GSK-3□對神經絲狀蛋白 M 的磷酸化作用點磷酸胺基酸種類分析得知胰島素第二訊號激脢 FA/GSK-3 □作用在神經絲狀結構蛋白 M 的絲胺酸上， 經高效能液態層析分析分離 後得到三個主要的胰蛋白水解磷酸胜汰訊號進一步利用愛德曼降階分析結 合胺基酸定序分析得知第一個磷酸訊號的胺基酸序列是 AKS(p)PVSK， 當 與神經絲狀結構蛋白 M 的胺基酸序列比對時發現是絲胺酸 603 (Ser603- Pro)，它是生理狀況下神經絲狀蛋白 M之磷酸化作用點，也正是胰島素第 二訊號激脢 FA/GSK-3□主要磷酸化位置之一。使用相同的方法亦證實絲 胺酸 502 (Ser 502-Pro)，絲胺酸 506 (Ser506-Pro) 和絲胺酸 666 (Ser 666-Pro) 是胰島素第二訊號激脢 FA/GSK-3□磷酸化主要位置而這 些位置都是生理狀況下神經絲狀結構蛋白 M 磷酸化作用點。 總括以上的 結果可提供一證據說明胰島素第二訊號激脢 FA/GSK-3□可能是一個生理 相關性的酵素且參與生理狀況下神經絲狀結構蛋白 M 的磷酸化因為絲胺 酸 502，絲胺酸 506，絲胺酸 603 和絲胺酸 666 都位在碳端尾端而附近 都有伕氨酸(Proline)存在，且絲胺酸 502，絲胺酸 506，和絲胺酸 603 都含有KSP序列。 這些結果更加指示胰島素第二訊號激脢 FA/GSK-3□可 能代表著伕氨酸指引之蛋白激脢 (Proline-directed protein kinase) 可能參與神經細胞骨架的磷酸化，而 KSP 則可能代表它獨特的磷酸化特 徵。