Abstract
神經突觸接合區(synaptic junction, SJ)為一個複雜而又精密的結構， 是神經元之間接觸及溝通訊息之所在。它包括了高度分化的前、後突觸膜 及之間的區域。後突觸膜區會隨不同性質的神經元而有不同，並且在後突 觸膜下方包括了一個電子顯微鏡下為深色的細胞結構，稱為後突觸緻密 體(posysynaptic density, PSD)。一般推測，PSD與調節神經訊息的傳導 有關。因為SJ蛋白質和前、後突觸膜的相連性及蛋白質間有很強的交互作 用，使得SJ蛋白質很難以其自然的形式被純化。在本報告中，我們從豬腦 中分離SJ，進行SJ蛋白質的分析。首先，使用guanidine- HCl溶出SJ蛋白 質，以分子篩層析法(gel-filtration chromatography)將蛋白質由其分 子量大小分群，再以SDS-聚丙烯氨膠體電泳法(SDS- PAGE)將蛋白質分離 。然後，直接在膠體上以胰蛋白酵素截切膠體中蛋白質，最後將被截切所 得的peptides以高效液相層析法(reverse-phase HPLC)純化，進而做氨基 酸序列分析。所得的氨基酸序列經由和 SWISSPROT資料庫中蛋白質序列相 比對後，許多peptides序列和已被報導與PSD有關聯的蛋白質之序列有很 高的相似性。這些蛋白質包括 tubulin、actin、NEM-sensitive vesicular fusion protein、 elongation factor 1，及calcium/ calmodulin-dependent protein kinase。也獲得許多peptide序列和已知 的蛋白質序列無有意義的相似性。此實驗方法可獲得許多peptide序列供 合成探針(probes)，為研究 SJ蛋白質結構和功能的另一種選擇。