Abstract
本實驗室從豬脾臟細胞核中發現一種特殊的 MAR (Matrix Associated Region) DNA, 命名為 Q1 MAR, 此 MAR 具有相當特殊的性質: (1) 這 段 MAR DNA 之 tandem multimers 在 polyacrylamide gel electrophoresis 具有較一般 B form DNA 快速的移動率 (mobility); (2) 當 Q1 MAR DNA 殖入載體 pUC19 後, 約 20 ∼ 30% 的 pUC19-Q1 為 knotted form 。 經由菌種的選擇及 DNA deletion 的 結果,推測該 knottng 的現象主要是取決於 Q1 MAR DNA 本身。我們想 進一步研究 Q1 MAR DNA 在脾臟細胞中的角色,因此我採用各種不同濃度 的鹽溶液來分段萃取細胞核蛋白,以尋找與 Q1 MAR DNA 結合的核骨架蛋 白可能有那些, 並初步研究其特性。在各種鹽萃取細胞核蛋白成分中發 現 C800 nuclear proteins ( 簡稱為 C800), 中有 cooperative type 及 noncooperative type 兩類的 DNA binding proteins, 其中屬 於 noncooperative type 的 DNA binding proteins ( 或 protein complexes) 只能夠與 Q1 DNA 結合,並不能與 A28 DNA (AT rich 的 MAR) 及 LacZ DNA(non MAR) 結合成 DNA-protein complex(es) 。 並 且與 Q1 結合的 Q1-specific proteins( 或 protein complex(es),簡 稱為 SBPC) 不太受 A28 及 LacZ DNA 競爭所影響。在 Southwestern blotting assay 的結果中, 用 Q1 DNA 和 A28 DNA 釣出相同的五至六 種的 MAR binding proteins 。 藉著 gel retardation 中 Q1-SBPC 的 band shift 值所計算出結合蛋白的分子量, 推測造成與 Q1 DNA結合 的蛋白不是單一的蛋白分子, 而是蛋白聚合物 ( pro- tein complex) 。