Abstract
目前由動物胰臟.蛇毒及蜂毒中已純化出五十多種磷酯脢. 雖然其來源不 同, 在鈣離子純在下, 均可特意異水解磷酯質第二個位置的酯肪酸鍵. 由 台灣眼鏡蛇毒純化的磷酯脢是酸性的單一生太, 由119個胺基酸組成, 有 七個雙硫鍵, 分子量為14千道爾頓. 本篇論文嘗試以化學修飾方法研究精 胺酸在蛇毒蛋白質中結構與功能上所扮演的角色.我們以phenylplyoxal來 對精胺酸做化學修飾, 經由高壓液相層析儀純化出兩個衍生物, 此二產物 在酸性膠體電泳中顯示單一帶狀, 所以此二產物應為均勻狀. 胺基酸分析 結果顯示兩個衍生物均只有一個精胺酸被修飾. 一個在精胺酸117, 一個 在精胺酸16, 並分別造成酵素活性降低12.1%及74.6%. 經由螢光反應知道 此二衍生物的鈣離子結合能力仍在, 而且只有一個結合位置. 以CD測其光 譜發現修飾衍生物的二級結構差異不大. 同時抗體反應也顯示其外部構形 並無太大改變. 由此可知此二衍生物的活性失去是因為精胺酸的電荷失去 造成. 而精胺酸16在酵素活性上應扮演很重要的角色. 可能是參與受質的 結合, 在受質與酵素的結合界面以其本身帶的正電荷和受質上的磷酸形成 靜電吸引, 幫助受質進入活性中心. 也有可能是幫助酵素形成活化的構形 以利受質的結合.