Abstract
細胞骨架蛋白的架構變化是逆境反應的主要特徵之一,而各種細胞骨架蛋 白中,又以中間絲蛋白的變化最為顯著,在此實驗中,我們主要利用大鼠 腦瘤細胞為實驗材料,研究逆境反應中細胞骨架的改變;我們以免疫螢光 顯微鏡、厚切片金粒子標定及穿透式電子顯微鏡來觀察中間絲蛋白在攝氏 四十五度加熱十五分後,其結構及分佈的改變。我們首先以掃描式電子顯 微鏡來觀察細胞的形狀變化,配合免疫螢光技術,發現在熱休克處理後恢 復兩小時,細胞會鼓起呈圓球狀;到了恢復四小時,細胞開始伸展,逐漸 恢復原來的形狀;而中間絲蛋白在恢復兩小時時,全部鬆垮;四小時後則 開始重新組合,分佈於細胞質內;細胞形狀的改變與中間絲蛋白的變化具 有密切的關連。我們進一步以厚切片及穿透式顯微鏡,來研究因熱休克鬆 垮的中間絲蛋白,是否會進入核內;結果顯示鬆垮的中間絲蛋白不會出現 在核的中央,因此,如果它進入細胞核,它只可能分佈於核膜內側;而由 穿透式電子顯微鏡的結果得知,在未處理細胞中,中間絲蛋白均勻分佈於 細胞質中,而熱處理後恢復兩小時的細胞內,大部分的中間絲蛋白聚集在 細胞核外圍,只有少量的中間絲蛋白會進入細胞核,且分佈在核膜內側。 由於金粒子判定上的困難,此結果仍需進一步的證實;另外,中間絲蛋白 的分佈改變,在熱休克蛋白的引發機制中所扮演的角色,也會被闡明。