Abstract
Trichoderma koningii G–39是由野生菌ω–10經紫外線照射而產生的變種，能將含5 ％甘油的洋菜培養皿中經磷酸處理的纖維素分解，本研究利用液內培養方法探討G–39對三種不同碳源所產生的纖維素分解酵素的差異。當只有葡萄糖存在時，纖維素分解酵素的分泌很低。在有纖維二糖和葡萄糖共同存在時，培養液pH值的變化和纖維素分解酵素的產生與只有葡萄糖培養時極不同。β–glucosidase 活性出現在發酵的初期而濾紙活性出現在β–glucosidase 活性開始消失的時候。利用纖維素做為碳源時，發酵所產生的纖維素分解酵素，濾紙分解酵素，磷酸處理纖維素分解酵素，最後出現為β–glucosidase 。由此可知G –39可因不同碳源而產生不同的纖維素分解酵素。而纖維二糖可以誘導β–glucosidase 和濾紙分解酵素的產生。由上可知G –39產生纖維素分解酵素的機轉是非常複雜。由纖維素當做受質培養所得的濾液中純化的exo–β–1，4 glucanase ，利用SDS 凝膠電泳顯示為單一純物質，分子量約為67,000，在endo–β–1 ，4 glucanase 存在下偵測相乘效應而得知exo–β–1，4 glucanase 在50℃以下及pH5?7時均尚稱穩定。因為缺乏受exo–β–1，4 glucanase 作用的專一受質，本研究亦試圖利用固相酵素免疫法來分析和定量此酵素。當利用純化的exo–β–1，4 glucanase 做雙層抗體三明治酵素免疫法時，其背景數值很高，而偵測範圍只約為3?25ug/ml。當進一步利用此方法偵測培養液內exo–β–1，4 glucanase 含量時，卻得相反結果，顯示培養液內有干擾物質存在。