Abstract
為了選殖Trichoderma 的纖維素分解酵素基因，進而得到更多有關纖維素分解酵素基因表現與調控的訊息，我成立了Tricoderma koningii G－３９ 和Trichoderma ree-sei QM ９４１４的基因庫。Trichoderma 的染色體DNA 的分離是利用酵素將發芽管製成原生質胞，再將細胞打破而取得染色體DNA 。利用核酸鑑識□MboI對染色體DNA 做部份切割，然後與EMBL３載體的BamHI 雙臂接合在一起。用in vitro packaging的方法將重組DNA 包裝起來之後，以溶菌斑混成法在限制性宿主NM５３９上做基因庫的篩選，所使用的探子是三段具有32P 放射性標誌的合成寡核□探子或32P 放射性標誌的CBH－１ cDNA探子。從自動放射顯影的結果去挑出訊號相對位置的溶菌斑，再做第二次篩選。正選殖體的DNA 將被抽取出來，用SalI去切割，並以南方氏吸漬法去確認cellobiohydrolase 的基因序切究竟位於那一個SalI鑑識片段中。