Abstract
金屬硫蛋白(metallothionein) 是一種低分子量，含高量半胱胺酸，並且可以結合金屬離子的蛋白質。這種蛋白質普遍地存在於動物、植物、微生物等生物體中。其生物功能，可能跟生物體內重要的金屬離子鋅之穩定性的維持有關，此外亦可能有協助生物體抵抗重金屬離子毒害的功能。在本實驗，我們自耐鎘的中國倉鼠卵巢細胞株（ＣＨＯ－Ｃｄr ）中，將其金屬硫蛋白基因二個異構形之一的金屬硫蛋白基因(I) ，及其啟動子的部份選殖出來。經過核酸定序分析後，我們發現金屬硫蛋白基因(I) 包含有三個exons 與二個introns ，其中第一個intron較第二個為長。將此基因與大老鼠的作相似性比對，發現它們之間有60﹪的相似性。至於此基因之啟動子部份，我們也發現存在有一些調節單元，像是APl和Spl結合部位，以及metalresponsive elements (MREs)。而經由primer extension之實驗，確認了這個基因轉錄起始點的位置。除此之外，我們也選用同時包含有這兩個金屬硫蛋白異構基因的DNA 片段，藉由Southern blot 的技術，證明這兩個異構基因的距離，大約是七千個鹼基對，它們的排列方式是基因(II)在基因(I) 5'端上游的位置。在實驗的最後，為了證明我們所選殖的金屬硫蛋白基因(I) 之啟動子部份，可以因金屬離子的刺激而表現，於是利用chloramphenicol acetyltransferase (CAT) 基因作為rep-orter gene，進行CAT assay 。所得的結果初步地證實，此啟動子似可因金屬的刺激而使活性增加，但是，其增加的程度遠不及我們所預期的。