Abstract
順－雙氨雙氯鉑（Ⅱ）(cisplatin) 所造成的細胞毒性，主要是因為其可和細胞內的DNA 形成共價鍵結合。SiHa細胞處理0-80 μM的cisplatin ４小時，或40 μM 0-16 小時，使用單株抗體62-5做酵素連結免疫分析(ELISA) 或細胞流動分析(FCM)來檢查細胞內cisplatin-DNA 鍵結物(adducts) 的含量，發現adducts 的量隨著增加cisplatin 處理的劑量或時間而增加。將ELISA 和FCM 所得的結果作相關，其ｒ值為0.97。HeLa和對cisplatin 具抗性的HeLa細胞(HeLa-CPR)，處理0-160 μM 的cisplatin ４小時，使用FCM 檢查，也發現adducts 隨著增加cisplatin 處理的劑量而增加，所形成的adducts 在HeLa細胞約為在HeLa-PCR細胞的1.5 倍。使用感應耦合電漿－原子發射光譜分析法(ICP-AES) ，測定cisplatin 在細胞內的累積量，前者約為後者的２倍。HeLa-CPR細胞比HeLa細胞形成較少的adducts 及累積較少的cisplatin，這些結果或許可以解釋HeLa-CPR細胞為什麼會比HeLa細胞對cisplatin更具有抗性的原因。以前的研究發現亞砷酸鈉 (SA) 前處理會增加CHO-K1細胞內adducts 的形成。使用FCM ，在SiHa、LeLa及HeLa-CPR細胞，也可得到相似的結果，其adducts 的形成隨增加SA前處理的劑量或時間而增加。使用ICP-AES 偵測細胞內cisplatin 累積的情形，也可得到和上述相同的結果。使用FCM 研究adducts 在HeLa或HeLa-CPR細胞內的形成與修補的情形，發現不論是否有SA前處理，adducts 在最初0－4小時內會先增加，然後再減少24小時後，在HeLa細胞內的adducts 量比HeLa-CPR細胞內的為多，具有SA前處理組比cisplatin 單獨處理組多。HeLa及HeLa-CPR細胞處理cisplatin ４小時，其50﹪致死劑量分別為2 和20 μM，若前處理80 μM SA 時，50﹪致死劑量降為1 和10 μM。此外，SA前處理所造成協力毒殺細胞的作用，亦隨著SA前處理的時間增加而顯著。分別將FCM、ICP-AES 及細胞毒性測試的結果作相關，均發現有很好的正相關(r＞0.95) 。這些結果指出，以FCM 方法測量cisplatin-DNA adducts 在細胞內的含量變化，可以作為預測細胞對cisplatin 的敏感性。本研究的結果也建議：SA前處理或可應用於改進cisplatin 在臨床治療方面的效果。