Abstract
本論文在建立DNA疫苗治療老鼠攝護腺癌的動物模型，以模擬利用DNA疫苗治療人類攝護腺癌的情形。在人類攝護腺治療中，通常以攝護腺特殊抗原(prostate-specific antigen, PSA)為基因療法之標的物，於是本論文在動物模型的抗原的選擇上，以正常老鼠攝護腺體表現的probasin蛋白質作為DNA疫苗基因療法的目標物。本實驗主題在利用基因重組技術，由老鼠攝護腺體取得probasin基因，與質體接合後，構築出可製造probasin的質體DNA (pIRESpuro-probasin)。再以此質體DNA做為DNA疫苗，用肌肉注射方式(i.m.)打入不同品系正常老鼠體內，觀察不同宿主引發的免疫反應，並且以組織切片觀察是否因為打入能產生大量自身抗原的質體，而使攝護腺組織產生發炎現象。對於未來動物模型的建構，利用轉染法(transfection) 將建構好的pIRESpuro-probasin質體植入失去表現probasin能力的老鼠攝護腺癌細胞株(TrampC-1)中，以模擬人類的攝護腺癌細胞分泌PSA的情形。 本論文成功建構出pIRESpuro-probasin質體DNA作為DNA疫苗，證明施打於動物體內並無副作用發生，並且構築了能分泌probasin的老鼠攝護腺癌細胞株(TrampC-1- pIRESp-probasin)，模擬人類攝護腺腫瘤，亦初步證實其腫瘤生成能力與原細胞株(TrampC-1)相同。未來實驗方向應朝結合probasin與細胞激素的DNA疫苗，輔助以建立anti-probasin monoclonal antibody，觀察細胞內或體內probasin蛋白質表現，以期能夠有效的建立以DNA疫苗治療老鼠攝護腺癌的模型。