Abstract
應用微生物特定酵素所具有的優秀催化作用,能獲得一般化學的方法在緩和條件下所不能進行的物質複雜的變換。固定化操作可節省酵素用量,簡化分離程序。基材選擇依酵素的特性及固定方法有所不同,最主要還是基材必須具有適當反應基(reactive groups)。聚丙烯醯胺為一親水性擔體,其側鏈醯胺基可藉多種不同化學方法加以修飾,是一種不錯的選擇。修飾過程中改質分子乙二胺、活化分子戊二醛之組合,可得最高的酵素活性表現及酵素固定量,每克擔體可固定0.95毫克的酵素。酵素固定前後最適pH值及最適反應溫度並無明顯改變,最佳活性表現維持在pH 6-7 之間,活性最佳表現為37~40℃。以電子顯微鏡(SEM)檢視擔體表面鍵結酵素情形,擔體表面存有許多孔洞,改質後細微孔洞已明顯被阻塞,表面平均孔徑減小許多,活化過程中阻塞情形越嚴重,孔洞逐漸被填平,酵素只能鍵結於擔體表面上。合成反應物S-(R-) Methyl-3-Acetylthio-2-Methylpropionate (MAMP),其純度為96%,常壓下再以固定化酵素催化MAMP水解反應,產物為降高血壓藥物前軀物S-(R-)Acetylthio-2-Methylpropionic Acid (AMPA)。將兩種酵素Candida cylindraceaLipase(CCL) 及 Mucor javanicus Lipase(MJL)分別固定於擔體上,酵素活性區域因與擔體表面鍵結使得立體構形改變,並使酵素光學選擇性產生變化。隨使用次數增加,酵素活性同時衰減,R,S之選擇性亦隨之改變。