Abstract
為了研究鼠類白血病毒(MuLV) 核酸銜接酵素在細胞內的核酸銜接過程, 以不含核酸銜接酵素的pMLV△IN-LUC載體作受質(substrate), 在與具有鼠類白血病毒核酸銜接酵素的pMAM-IN 載體分別轉化感染(transfection)到NIH/3T3 細胞後, 由其病毒的產生來研究核酸銜接酵素的表現能力。而病毒顆粒產生可由反轉錄酵素活性分析 (RT assay)(38)來得知。為了在細胞內研究核酸銜接酵素的作用機轉, 所以必須先建構一個可以穩定表現含pMLV-K IN的細胞株 (cell line)。在建構完成可以穩定產生MuLV IN 的細胞株後, 本欲以pMLVΔIN-LUC 轉化感染後收集病毒顆粒, 但經數次的轉化感染仍無法產生病毒顆粒, 其可能的原因除了人為的疏忽外, 或是因為多次的基因重組(clone)造成MuLV 基因改變, 另外亦有可能是 luciferase 基因所接入的位置影響病毒的轉錄(transcription)。