Abstract
在過去許多探討神經細胞的力學研究當中,應力刺激對神經突觸的生長,扮演著相當重要的角色。本篇研究裡,我們發展出一套實效且穩定的拉伸平台,並結合黃光微影的微流道技術,探討神經細胞的力學現象。我們主要是利用具有彈性的PDMS為拉伸的基材,經由黃光微影製程,在其上製作特定尺寸的微流道,經由拉伸PDMS基材,使培養在基材上的神經幹細胞可以感受到拉伸應力的刺激。這樣的設計,便於我們探討神經細胞的力學反應,並可觀察接近單一細胞尺寸之神經軸突的生長。經由不同的培養條件及拉伸參數測試,當神經幹細胞受到拉伸而感受到應力刺激時,神經突觸的生長,及軸突的延長有顯著增加的效果,以預先讓細胞貼附12小時,再進行拉伸實驗測試而言,拉伸參數為1 mm/day的組別在7天的培養之後,總突觸長度可達240 μm,比沒有拉伸的組別增加約30%,突觸相位角為較趨於水平方向的28°。此外,我們亦利用免疫螢光染色,觀察細胞在受到機械應力刺激後的分化成熟情況,從標定神經細胞的螢光蛋白β Ⅲ tubulin之表現量得知,當神經幹細胞受到拉伸應力刺激時,大約於培養7天後,比未受應力刺激的神經幹細胞,有明顯朝向神經細胞分化成熟的趨勢。而神經幹細胞在水平方向,和垂直微流道方向上的成熟差異性,以目前的實驗天數未觀察到有顯著的差別,需再經由長時間的培養觀察,才得以看出應力刺激,對水平和垂直於拉伸方向的神經突觸,其生長和分化成熟度的影響。