Abstract
順一雙氨雙氯鉑(cis-pt)是一種致癌物質也是一種抗癌藥物。它的作用主要是基於它與細胞的去氧核醣核酸(DNA) 上的鳥糞嘌呤(guanine) 和腺嘌呤(adenine) 上的 原子結合形成鍵結物, 進而抑制DNA 的復制。而鍵結物的形成被認為是癌變過程中重要的起始事件。利用對抗此鍵結物的抗體及免疫化學方法來研究此鍵結物的形成，其靈敏性、特祑性、省時及重現率很高，有其他方法所不及的優點。用牛胸腺單股去氧核醣核酸(DNA) 與順一雙氨雙氯鉑(cispt) 反應形成的鍵結物已發展出了老鼠單源抗體。以酵素連結免疫吸附分析法(ELISA) 測知，兩個單源抗體和62-5能夠辨認經由cis-Pt作用過之單股或雙股DNA ，但不能辨認未經cis-Pt鍵結之DNA 或是cis-Pt本身。cis-Pt-DNA, trans-Pt-DNA和cis-Pt-poly d(GC) 對單源抗體或62-5與cis-Pt-DNA鍵結物的結合有競爭性。利用免疫螢光染色法證明單源抗體62-5(但非 ) 與cis-Pt處理過的中國倉鼠卵巢細胞(CHO-K) 的細胞核能形成特祑性的結合。用cis-Pt處理的細胞的經過0?32 小時的恢復期后，其螢光強度有隨著恢復期之增長而減弱的現象。抗體62-5與trans-Pt, methyl methanesulfonate,ethyl methanesulfonate,N-meth-yl-N-nitro-N- nitrosoguanidine和4-nitroquinoline l-oxide處理過的CHO-K 細胞無免疫螢光反應，對cis-Pt具抗藥性的CHO-K 細胞在處理cis-Pt之后比正常的CHO-K細胞其免疫螢光強度較弱。由免疫螢光染色法和流動細胞計數儀之分析顯示，處理過cis-Pt的G1期細胞比S 期或G2/M期細胞的螢光強度為弱。免疫螢光染色之結果指出，亞砷酸鈉前處理會，但后處理則不會增加cis-Pt處理過的細胞之免疫螢光強度。應用酵素連結免疫吸附分析法測得人類癌症細胞株如食道癌CE-48T、肝癌Hep-3B、Mahla-rvu、HA-59T、Huh-7和SK-Hep1等經cis-Pt 作用后, 與抗體62-5的結合反應程度不同。