Abstract
本實驗分成下列幾個部份：(1)以商用固定化酵素D-Hyd1探討hydan-toinase的動力學性質，並研究此酵素在高基質濃度下的反應情形。(2)對於土壤菌DH 101，尋找較佳的培養條件；並將DH 101以褐藻膠固定化，建立適當之固定化條件。(3)對於固定化DH 101，尋找較佳之反應條件，並進行長時間甚至多次批式反應。固定化hydantoinase最適的反應條件為40℃、pH值 8.0；其Km值為16 mM，比活性則為146unit/g D-Hyd1。進行高基質濃度反應時，必須對反應溶液之pH值做精確控制(7.80±0.05)，避免衍生物的產生，最大轉化率可達96%以上。培養基組成中sucrose、peptone及yeast extract之濃度皆為10g/l時性最大，可達約18.2unit/gcell。另外也以chiral column分析產物之光學純度，證實其光學選擇性極佳(e.e.值在99%以上)。將DH 101以褐藻膠-氯化鈣系統固定化後，最大菌體包埋密度可達100 mg/ml gel，其比活性為0.422 unit/ml gel，最佳反應條件同樣為40℃、 pH值8.0；多次批式反應可重複進行五次以上，轉化率亦皆可達95%左右。