Abstract
在本研究中，我們以遺傳工程方法建造出兩個融合毒素：其一為包含表皮生長因子(epidermal growth factor) 與綠膿桿菌外毒素A(Pseudomonas exotoxin A) ，命名為EGF-PE，另一為包含表皮生長因子(epidermal growth factor) 與去除掉區域la (細胞結合區) 的綠膿桿菌外毒素A(Pseudomonas exotoxin A) ，命名為EGF-PE(Δla)。此二融合毒素皆能與抗表皮生長因子抗體(anti-EGF antibody) 及抗綠膿桿菌外毒素A 抗體(anti-PEantibody) 作用, 證明其包含表皮生長因子與綠膿桿菌外毒素A 。以老鼠纖維母細胞株NR6(其含有綠膿杆菌外毒素受體而無表皮生長因子受體) 為材料所做的細胞毒性實驗顯示，融合毒素EGF-PE能殺死NR6 細胞，而融合毒素EGF-PE(Δla)無法。然而，對老鼠纖維母細胞株NR6 施以基因移轉方法使其表現人類表皮生長因子受體，所成之細胞株命名為NR6HER。我們發現此NR6HER細胞株在其細胞表面表現極多量之人類表皮生長因子受体，且能被融合毒素EGF-PE(Δla)所殺死。融合毒素EGF-PE(Δla)對EGF-PE(Δla)所殺死。融合毒素EGF-PE(Δla)所殺死。融合毒素EGF-PEΔla對NR6HER細胞的毒性能被過量的包含表皮生長因子所阻斷, 而融合毒素EGF-PE則無法為過量的表皮生長因子所阻斷。要阻斷融合毒素EGF-PE的細胞毒性, 必須要同時阻斷表皮生長因子受體與綠膿桿菌外毒素受體路徑。這些資料顯示融合毒素EGF-PE同時具有表皮生長因子與綠膿桿菌外毒素的結合特性, 而融合毒素EGF-PE(Δla)只具有表皮生長因子的結合特性。所以，融合毒素EGF-PE(Δla)對含有表皮生長因子受體的細胞表現了較佳的目標特異性, 應為較佳的融合毒素。我們並且檢試了融合毒素EGF-PE (Δla) 對幾種人類癌細胞如A431, KB-3-1以及正常皮膚纖維母細胞的細胞毒性。我們發現融合毒素EGF-PE(Δla)能很有效的殺死人類癌細胞而對正常皮膚纖維母細胞幾無毒性; 此外, 人類癌細胞表現越多的表皮生長因子受体, 則對融合毒素EGF-PE(Δla)越敏感。