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冷凍與高溫對細胞存活及耐熱性的影響
Thesis

冷凍與高溫對細胞存活及耐熱性的影響

張淑玉
Masters, National Tsing Hua University
1984

Abstract

冷凍高溫細胞存活耐熱性存活曲線合併期望值致死傷害保護劑 LETHAL-DAMAGE
本論文為冷凍與加熱對V79 細胞之存活率及耐熱性之研究。在低溫誘導耐熱性的實驗中,分別以41℃和42℃連續加熱3或4小時,即可觀察到細胞的耐熱性,細胞不論是黏附在組織培養皿或以懸浮態,施予熱處理,其存活情形所差不大。將pH值由7.6 提升到8.2 ,則所得存活率,亦無明顯的不同。細胞在加熱前,如先給予冷凍─解凍處理,則其存活曲線相當於單獨受熱處理的存活曲線,向下平移,即冷凍─解凍處理並不影響細胞對熱反應的敏感度,而且也不影響耐熱性的產生。細胞在加熱後,無論其產生耐熱性與否,加熱80分鐘,尚未形成耐熱性,或加熱350 分鐘,已形成耐熱性,給予不加保護劑的冷凍─解凍處理,則其存活率低於單獨加熱和單獨冷凍處理的合併期望值,此存活率的降低程度,在非耐熱細胞和耐熱細胞是一致的。如冷凍─解凍過程中,給予保護劑0.5M的dimethylsul foxide(DMSO)或0.5M的glycerol,則非耐熱細胞,其實際存活率亦低於兩種單獨處理的合併期望值,但其降低的程度與保護劑的種類無關。這種現象的可能原因有二:?冷凍使得加熱時形成的非致死傷害(sublethal damage),成為致死傷害(lethal damage )。?加熱殺死對冷凍具抗性的細胞。但在耐熱細胞,則實際存活率卻高於兩種單獨處理的合併期望值,而其上升的程度亦與所施用的保護劑的種類無關,此結果可能是加熱誘導了某種細胞內生化變化,而與保護劑共同使用時,對冷凍產生抗生。

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