Abstract
蛋白質是一個巨大的分子,需摺疊成固定的三度空間結構才具有活性,近年來,人類發現於細胞中有所謂的分子伴護子(molecular claperone)的存在,這些分子伴護子具有協助其他蛋白質摺疊成正確結構的功能,因此了解其作用的機制就成為了解蛋白質摺疊的一塊墊腳石,於本論文中,選用了本實驗室研究得很詳盡的hFGF-1來和目前了解最透徹的分子伴護子-GroEL進行作用。由螢光實驗發現只加GroEL會使hFGF-1不穩定,但再加了ATP後使得此不穩定的情況消失,推論這是GroEL先和hFGF-1結合,再加了ATP後又放開,FPLC(gel filtration)及胰蛋白?裂解(Trypsin digestion)的實驗結果支持這項推論,ANS結合(binding)實驗顯示GroEL在部份開散時效用增強的現象並非來自於疏水性囊袋(hydrophobic pocket)的產生。於動力學上的研究,停止流(Stopped-Flow)螢光實驗的結果顯示,在pH=5.5而且GroEL及ATP存在的情況下,摺疊的速度會加快,抑制流(Quench-Flow) NMR的結果也和此現象相符,而且在比較過有、無GroEL存在的結果發現,GroEL可降低hFGF-1摺疊反應的活化能,使得摺疊路徑產生相當大的改變。