Abstract
木腐黴Trichoderma koningii G－３９為一分絲狀真菌，藉由給予纖維素或木聚醣做醱酵培養基中唯一之碳源，可誘導其生合成多種有關水解纖維素與木聚醣之酵素。將培養菌體所得粗酵素液，經硫酸銨沉澱濃縮，再經一系列離子交換樹脂及膠體過濾管柱層析分離，已純化出一種纖維素外聚葡□（exoglucanase； C１），三種纖維素內聚葡□（endoglucanases；Cx－１，Cx－２，Cx－３），一種木雙醣□（β－xylo－sidase； X－１），及一種內木聚醣□（endoxylanase； X－２）。利用蛋白質電泳分析（SDS-PAGE）所測得之相對分子量依序為６８ k，５３．４ k，２５ k，２２．３ k，５４．２ k及２１．５ k；而由等電位聚焦電泳（IEF ），所測得的等電位值（pI），分別為４，５．３，７．３，７．３，８．５及８．９。所分離出的此六種酵素在電泳膠片上都為單一帶，顯示約度幾達均一。其中，對分子量較小的纖維素內聚葡 Cx－３與內木聚醣□ X－２，並進行了多種酵素性質之分析以及蛋白質胺基酸組成分析。在基因之分子選殖方面，是以四種不同誘導源培養所得菌絲抽取之訊息核酸（mRNA），分別合成其相對之互補基因（cDNA），再接入表現載體λgtll；自利用不同誘導源所建立的三個互補基因庫（cDNA libraries）中，以對抗所純化出酵素蛋白製備得之專一性抗體為探針進行對各酵素相對基因的篩選，其中較小分子量的木聚醣□ X－２及纖維素□Cx－３的部分互補基因已被成功圴選殖到（其長度分別為３５５bp及７９４bp），其完成了其核酸定序分析。而由電腦基因庫資料查詣比對結果得知，３５５bp的 X－２cDNA片段的序列是獨一而且是十分特殊的。