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利用Arthrobacter simplex進行Prednisolone之20酮基還原反應之研究
Thesis

利用Arthrobacter simplex進行Prednisolone之20酮基還原反應之研究

李豐存
Masters, National Tsing Hua University
1985

Abstract

氫化皮質酮還原反應酵素20酮基 ARTHROBACTER-SIMPLEXPREDNISOLONEHYDROCORTISONE
以Arthrobacter simplex轉換氫化皮質酮(Hydrocortisone)時,產物Prednisolone(PDL )有繼續被反應的現象產生。本研究以Prednisolone為基質,利用A. simplex進行轉換反應,再將產物分離、純化與分析,鑑定其化學結構為20β-Hydroxyprednisolone(RPDL),證明A. simplex同時具有△1 一脫氫轉換酵素及20- 酮基還原酵素。菌體在Phosphate buffer中,測得20- 酮基還原酵素進行轉換之最適pH及溫度分別為7.0 及35℃。由Langmuir plot 求得Vm=0.03289g-RPDL/g-cell•hr及Km=0.1316g-PDL-1 。測得有效濃度因子f =0.34,顯示當固態基質存在時,其基質有效濃度低於實際基質濃度。由動力學模式可以預測產物濃度與時間的關係,顯示所建立之模式相當可靠。本研究亦探討有機溶劑、金屬離子及阻害劑等對20- 酮基還原酵素的影響。添加2 %的Toluene使酵素活性提高80%,而添加α,α-Dipyridy、pCMB等阻害劑及Cu++則使酵素活性顯著地降低。

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