Abstract
Postsynaptic density (PSD) 是一個細緻的圓盤狀結構，它位於後突觸膜的下方，與調控後突觸的訊息傳遞有關，並且經由調控突觸區域的活性，PSD被相信與學習和記憶有所關聯。之前有許多研究，利用不同的方法來研究PSD的組成，發現其中含有多種蛋白，包括glutamate receptors、 scaffold proteins 和 signaling proteins等等，近年來利用高效率及高解析度的質譜儀系統，現已分析出近500種PSD的組成蛋白。我們實驗室利用不同pH值範圍與不同濃度的二維電泳膠片，分做四個區域來研究PSD組成蛋白在二維膠片上的分布，發現到有超過600個具再現性protein spots的表現，相信可能仍有許多未知的PSD組成蛋白尚未被發現。而我們在二維電泳方面的研究，亦大為改善PSD組成蛋白在鹼性pI值與低分子量區域的分析效果。另外，借助MALDI-TOF的分析，我們做了八個major protein spots的鑑定，發現它們表現在2-D gel的pI/MW值與MW的實際值和pI的理論計算值都很接近。α-CaMKⅡ是PSD中的主要蛋白之一，過去的研究沒有明確的找出它在2-D gel上的位置，我們原本想利用二維電泳配合Western Blot做α-CaMKⅡ的定位，卻發現α-CaMKⅡ在不同pH值的溶液中，表現在膠片上的量不同。於是我們做了溶解度測試的實驗，發現pH6-11 IPG buffer是促成α-CaMKⅡ有效溶解的主因。未來我們可以利用pH6-11 IPG buffer配合改良的二維電泳條件，以期正確定位出α-CaMKⅡ在2-D gel的位置，這將有助於了解α-CaMKⅡ不同的磷酸化狀態，並且推測α-CaMKⅡ是如何調控與PSD之間的關係。