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利用伽瑪射線引發玻璃態單體聚合的方法去固定澱粉酵素之研究
Thesis

利用伽瑪射線引發玻璃態單體聚合的方法去固定澱粉酵素之研究

林武雄
Masters, National Tsing Hua University
1982

Abstract

伽瑪射線玻璃態2-羧基丙酯澱粉酵素HPMA-2- 羧基丙酯單體聚合法黏著法高分子化學工程 2-HYDROXYPROPYL-METHACRYLATEMICHAELIS-MENTENADHENSION-METHODHIGH-MOLECULECHEMICAL-ENGINEERING
本論文是將親水性的單體,甲基丙烯酸2-羧基丙酯(2-hydroxypropyl methacrylate,HPMA),在-24℃的低溫下使形成玻璃態,以伽瑪射線(γ-ray )引發單體聚合之方法去固定澱粉酵素(α-Amylase )。欲應用固定化酵素進行實際生產前,必須對它的基本性質有相當了解,才能得到最適當的操作條件;在這些方面本論文進行下列幾項實驗:照射劑量對酵素的影響、照射溫度對酵素的影響、擔體的孔洞結構和含水率與固定酵素活性的關係、反應溫度對酵素活性的影響、pH值與酵素活性的關係、可溶性及固定化酵素的活化能和Michaelis-Menten常數(Km值)等。另外探討在單體系中添加過冷試劑(Supercooling agent)及改變溶劑對擔體結構和酵素活性的影響。結果顯示,在低溫下此可溶酵素具有相當高的抗輻射性(radio-resistant );固定化的最佳劑量和照射溫度分別為1MRad及-24℃;所獲得固定化產物表面有許多孔洞結構且此等孔洞的大小影響固定酵素的活性和在重複使用後的活性保留量;固定化酵素在pH8及40℃下有最高活性;可溶酵素在pH8及50℃有最高活性。本文所用的方法稱作黏著法(adhension method),是屬於包容法的一種,以此種方法所獲得的固定化產物具有如下的特點。1.它適於對各種生物成份物,如酵素、蛋白質、抗原、抗體、菌體、賀爾蒙的固定。2.可使用成玻璃態單驗和乙烯系單體的混合物做為固定的材料,且對材料性質的限制也少,如此料材的選擇性很廣。3.固定的產物能具有很高的活性產量(activity yield)和經長期使用後的活性保留量。4.所得固定化產物表面具有許多孔洞結構,而且大部份酵素包容在孔洞的網狀結構內,如此與高分子量受質的反應是為可行。5.容易成型為各種形式的產物,如膜狀、粒狀等。

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