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利用合成 探討臺灣眼鏡蛇磷脂 甲之抗原性決定基
Thesis

利用合成 探討臺灣眼鏡蛇磷脂 甲之抗原性決定基

林慧嫻
Masters, National Tsing Hua University
1990

Abstract

MERRIFIEILD固相眼鏡蛇合成胎勝酵素免疫分析磷脂 甲抗原性決定基胺基酸殘基 (IMMUNOGENIC DETERMINANT)
我們利用Merrifield固相法合成相當於Naja naja atra Phospholipase A (PLA ) 臺灣眼鏡蛇磷脂 甲之胺基酸序列位置1-10, 49-56 和110-120 的三段勝 。本實驗以此三段合成勝 分別誘導能夠辨識PLA 磷脂 之抗勝踽血清。由醇素免疫分析的結果顯示,免疫後所產生的抗勝 血清皆可與原誘導勝 反應。但對於PLA 磷脂 之辯識,則只有抗PLA (1-10)和抗PLA (49-56) 兩抗勝 血清能與PLA 磷脂 辯識結合,因此我們推測胺基酸序列位置1-10和49-56 是PLA2磷脂 上的兩段抗原決定基。不同於抗PLA 磷脂 之單株抗體PD84的是,此三抗勝 抗體皆能與Reduction 和S-carboxylmethylation 造成立體結構被破壞之PLA 磷脂 結合就此結果單株抗體與抗勝 抗體之不相同專一性可以做一區別,即單株抗體對抗原的辨識需倚賴三度空間的構形而抗勝 抗體則否。我們發現抗PLA (1-10)勝 抗體對於胺基酸序列位置1-9 完全相同的Homologous蛇毒磷脂 卻無辨識結合反應,其可能理由為(1) 所相異的第10個胺基酸殘基,對抗勝 抗體和磷脂 的辯識結合作用是相當重要的關鍵。(2) Homologous蛇毒磷脂 的氮端區域在立體構形上具有差異。由PLA 磷脂 的酵素活性受抗PLA (1-10)勝 抗體的抑制影響,我們瞭解此位置1-10之抗原性決定基(Immunogenic determinant) 亦同時為N. naja atra PLA 磷脂 之重要活性區域。

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