Abstract
腱前磷 神經毒素 beta1-Bungarotoxin (beta1-Bgt) 由 A 鏈和 B 鏈組成, 其間以一雙硫鍵連接 beta1-Bgt 的 A 鏈胺基酸序列與其他具有磷脂酵素活性的蛇毒相似; 為了探討 beta1-Bgt 結構上那些區域與其生物活性有關, 我們成 beta1-Bgt A 鏈胺基酸序列 1-10 (BP1), 55-67(BP2), 64-78 (BP3) 和 95-114 (BP4) 等多段胜, 並利用這些胜免疫兔子製備抗胜抗體去探討酵素活性與毒性的關係。此外這些抗體亦可當做結構探針去偵測 A 鏈和 B 鏈分開後, A 鏈構形的改變與其它磷脂蛇毒在這些相對位置的差異同時配合 Circular dichroism 解釋之。將 beta1-Bgt 與這些抗胜抗體反應均可抑制其酵素活性, 除了抗 BP2 抗體不具有抑制毒性的能力, 其它抗體都會抑制毒性然其中抗胜抗體具中和毒性的能力與其抑制酵素活性的能力並無必然關係由於這些抗胜抗體對 RCMbeta1-Bgt A 鏈比對 beta1-Bgt 有稍高的辨識能力, 顯示這些胜在beta1-Bgt 可能有較複雜的構形。將 A 鏈和 B 鏈分開, beta1-Bgt 會失去酵素性和毒性, 由於抗胜抗體對分開的 A 鏈的辨識能力與 beta1-Bgt稍有差別, 似乎分開的 A 鏈構形有些改變, 但經 CD 分析得知分開的A 鏈仍具與其它磷脂相近的二級結構。此外以 CD 分析 beta1-Bgt 和beta2-Bgt 的 B 鏈之二級結構,發現此二不同 B 鏈 (B-1 鏈和 B-2鏈 ) 有較明顯的差異。 既然 beta1-Bgt 和 beta2-Bgt 的 A 鏈相同,但酵素活性與毒性不同, 因此 B 鏈對 A 鏈的局部構形有影響並藉以維持具不同的構形。