Abstract
利用融合瘤技術得到三株抗Naj naja atra(台灣眼鏡蛇磷脂 的單株抗體，其中有兩株單株抗體 (1E531 和5F92) 對Naja naja atra磷脂 的酵素活性有抑制作用，另一株單株抗體(5F6F10)則沒有影響。經由reduction 和S-carboxymethylation可破壞N-aja naja atra 磷脂 的立體結構，使其無法與三株單株抗體形成結合，顯示 Najanaja atra 磷脂 上的抗原決定基應是由立體空間上位置相近的 片段所構成。再利用gel filtration方法分析，得知抗原決定基彼此相互靠近且重疊。利用Naja na-ja atra 磷脂 化學修飾衍生物和相似性蛇毒磷脂 於競爭性放射免疫分析中，得知Tyr-3，Lys-6，Try-63，Lys-65和氮端 片段在Naja naja atra磷脂 的抗原決定基中扮演相當重要的角色，且此三抗原決定基包含相似性蛇毒磷脂 胺基酸序列中相似性最低的 片段。我們從蛋白質的一級結構中，可以預測Naja naja atra磷脂的兩性區域並配合放射免疫分析所得結果，推測出 片段16－30和79－88應是構成此三抗原決定基的一部分。然後根據牛胰臟磷脂 的三度空間結構，可以發現 Tyr-3，Lys-6，Tyr-63，Lys-65 和氮端 片段所構成之區域恰好位於預測的兩 片段之間，所以此區域應是三抗原決定基互相重疊的地方。抗Naja naja atra磷脂 單株抗體1E531 和5F92可以抑制Naja naja atra磷脂 的酵素活性，其所辨識的抗原決定基可能是在Naja naja atra磷脂 酵素活性中心周圍的胺基酸殘基3，6，63，65，及片段16－30。而另一抗Naja naja atra磷脂 單株抗體5F6F10由於不能抑制酵素活性，其所辨識的抗原決定基可能是在離Naja naja atra磷脂 的酵素活性中心較遠的 片段79－88和胺基酸殘基3，6，63，65。