Abstract
為了做XP10基因體的純系化,本文首先定出了XP10的各種核酸限制 的剪切樣式,共包括BamhI,HindIV,KpnI,SalI,SstII,SmaI,XhoI及XbaI等八種,且計算出XP10 DNA的分子量為42-47kb之間之選取四種限制 SmaI,XbaI,XhoI及SstII,進行XP10DNA的物理拼圖(physical mapping),然後進行XP10DNA的純系化,選取質體PNO1523及PKT230當做轉形媒介體,分別對大腸菌及XP10的寄主細菌做轉形作用。以質體PNO1523DNA當媒介體,轉形進入大腸菌CS412及PR1,其轉形頻率分別為:在大腸菌CS412 SmaA=12cell╱ gDNA,SmaB=8cell╱ gDNA,SmaC則未得到轉形體;在大腸菌PR1,SmaA=12cell╱ gDNA,SmaB=8cell╱ gDNA,SmaC=4cell╱ gDNA。以質體PKT230DNA為媒介體,對噬菌體XP10的寄主細菌做轉形後,轉形頻率分則為=Xh_eA=20?120cell╱gDNA,Xl_10B=80?100cell╱ gDNA,Xl_10C=80?100cell╱ gDNA,Xh_0D=40?100cell╱ gDNA,Xh_0E=80?100cell╱ gDNA。其轉形頻率由於處理水稻白葉枯病菌或接受細胞(competent cell)方法的不同,XP10DNA插入質體中片斷大小的不同而有所差異。同時也以質體PKT230DNA當媒介體,轉形到大腸菌SK1592及600內,其頻率為:在大腸菌SK1952,Kh_eA=40cell╱ gDNA,Xh_0B=20cell╱ gDNA,Xh_0C=200cell╱ gDNA,Xh_0D=20cell╱ gDNA,Xh_0EE=40cell╱ gDNA。這結果顯示出XP10基因體轉形至其寄主細菌的可行性。