Abstract
本研究內容是利用水溶液兩相系統, 初步分離發酵液中的鹼性蛋白酵素, 以簡單的分離程序, 可同時達到去掉菌體、濃縮及純化的目的。與傳統分離程序比較, 具有不少優點。本文探討的範圍包括: 鹼性蛋白酵素之發酵過程, 兩相系統的組成; PEG 分子量、pH值、PEG濃度、KHPO 濃度等變因, 對於不同發酵液 (去掉菌體的發酵液或全發酵液) 及純溶液中鹼性蛋白酵素萃取效率之影響。其中包括對於分配係數收率及純化倍數之探討, 並由此推導酵素在PEG╱ 鹽類系統中之分佈狀況。結果顯示, 在PEG╱KHPO 系統中, 鹼性蛋白酵素大部份是分佈在PEG 相中, 且分配係數可達1000以上, 無論發酵液內的雜質或是菌體, 對於酵素的分佈不會造成很大的影響。一般來說, 純酵素溶液所得的鹼性蛋白酵素比去掉菌體的發酵液來得大, 再大於全發酵液。且當PEG 分子量愈小、PH值愈大、相組成愈遠離臨界點, 則鹼性蛋白酵素的分配係數會愈大。根據以上的結果, 擴大實驗的規模, 要行94％的回收率, 2.6 倍的濃縮效果, 1.22倍的純化效果。兩水相系統對於全發酵液的萃取, 克服了傳統有機溶液萃取及薄膜分離, 菌體存在所引起的分離困擾。是目前處理全發酵液較佳的方法之一。應用在洗衣粉的添加酵素而言, 比傳統的方法更具有經濟的效益。不過較遺撼的是, 到目前為止並沒有一個理想的理論模式來預估實驗的結果。