Abstract
蛋白分子的功能與結構息息相關。本論文即利用穿透式電子顯微鏡 ( TEM ) 來觀察 AMPA/kainate 次類型麩胺酸受器蛋白的顯微結構，以期了 解它的功能。自豬腦中分離所得的 synaptic junction，可以用 1﹪ Triton X-114 及 0.15 M KCl 溶解出其中的 AMPA/kainate次類型麩胺酸 受器蛋白；再依序經過 DEAE-anion exchange chromatography、wheat germ agglutinin Sepharose 4B chromatography、sucrose density gradient centrifugation 步驟純化後，以 SDS-PAGE ( silver stain )及 Western blot 證明可得到純度 80﹪以上之麩胺酸受器蛋白。將純化 出來之麩胺酸受器蛋白，以 2﹪phosphotungstic acid ( pH 7.5 ) 為染 劑作負染色處理後，至穿透式電子顯微鏡下觀察。觀察結果的確發現有類 似麩胺酸受器之顆粒狀物的存在；拍照後，利用 densitometer 統計此顆 粒狀物的平均直徑大小約為 18-30 nm 左右，此一結果與本實驗室以前 經 gel filtration 和 hydrodynamics 方法所計算出來的 Stoke's radius 相符。再者，由於樣品中麩胺酸受器蛋白的純度在 80﹪以上，且 其控制組中經多次觀察並沒有發現類似的顆粒狀物。因此，推論此顆粒狀 物應該即為麩胺酸受器蛋白複合物。另外，我們使用影像處理軟體放大麩 胺酸受器蛋白複合物 ( complex ) 的照片，並加強其黑白對比，嘗試解 出麩胺酸受器蛋白複合物的四級結構 ( quaternary structure )。