Abstract
心肌毒蛋白, 和高於32倍量之氰酸鈉進行氨基甲醯化反應於0.125M PH8.5磞酸緩衝溶液中培養在29℃, 在不同的反應時間後, 加入Glyeylglycine 中止其反應, 然後去除掉多餘之試劑, 但分離於離子交換色層分析管柱, 可得八個分劃(Fraition)。心肌毒蛋白具有十個氨基, 一為位於N 極端之白胺酸, 另九個分佈於離胺酸中, 若完全的把這些氨基化學修飾, 則產生沉澱而不溶於水溶液中。應用氨基甲醯化反應來了解毒蛋白構造組成對生物活性的功能, 並利用半致死量, 凝膠電冰, 免疫擴散凝集以及溶血作用, 胜 併圖等方法, 了解氨基甲醯化蛋白衍生物之生物特性以及被修飾的位置。在PH4.5,12% 凝膠電冰分析數據, 得知甲醯化衍生物除了分劃七外, 皆為單一凝集帶, 並由胜 併圖知, 離胺酸35, 最容易被修飾, 並且顯示, 其中二個分劃, 具有二種衍生物之混合。在半致死量之測定, 顯示毒蛋白之氨基甲醯化衍生物之毒性, 隨 被修飾程度之增加而降低。其中分劃4 至分劃1 之毒性非常低或無(＞20ｕｇ╱gmouse), 而這四個分劃, 最少有四個氨基被修飾( 由胜 圖得知),在免疫擴散凝集反應, 得知醯化衍生物和未被修飾之心肌毒蛋白, 皆可得相同之凝集帶。由此知被修飾之毒蛋白免疫性並無受到影響。除了修飾於離胺酸35之分劃8 次外, 其餘衍生物之溶血速率, 隨 被修飾之程度增加而減低。分劃8 之溶血速率高於心肌毒蛋白 (未被修飾) 。可能由於離胺酸與靠近厭水性胺基酸順序片段, 而增加厭水性度(Hydropholieity)所導致。因厭水性度和鹼性度(Basicity)被認為和心肌毒蛋白作用於細胞腹之反應有息息相關的活性功能。