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台灣眼鏡蛇心肌毒素Ⅲ之高解析核磁共振光譜研究
Thesis

台灣眼鏡蛇心肌毒素Ⅲ之高解析核磁共振光譜研究

張壽麟
Masters, 國立清華大學, 生命科學系
1989

Abstract

心肌毒素Ⅲ 高解析核磁
心肌毒素為臺灣眼鏡蛇(Naja naja atra)的主要蛇毒蛋白,它包含至少五種已鑑定的類構物。本研究針對其中含量最高的第三種心肌毒素(CTXⅢ)利用Bruker MSL - 300 及Bruker AMX - 600核磁共振光譜儀,進行溶液中蛋白質結構分析的研究。 利用在H2O及D2O溶液中之氫二維同核核磁共振光譜:雙量子節 - 化學位移相關光譜(DQF - COSY)、長距離 - 化學位移相關光譜(COSY - LR)、全相關化學位移相關光譜(TOCSY),經由鍵的訊息在CTXⅢ的60個胺基酸中,我們認定了兩個Glycine,兩個Alanine,七個Valine,三個Leutionine,一個Isoleucine,七個Lysine,一個Arginine,二個Metionine。藉助13C - DEPT光譜以及二維碳氫異核化學位移相關光譜(13C -1H COSY),認定了三個Threonine和兩個Serine。利用二維NOE效應光譜(NOESY)中苯環氫與胺基酸支鏈氫經由空間的NOE訊息認定出了三個Tyrosine及二個Phenylalanine。五個Proline的自旋系統可被認定但仍待進一步確定。剩餘的AMX自旋系統胺基酸Cysteine ,Aspartate, Asparagine,以及二個Lysine,三個 Leucine及在序列認定時利用序列NOE的訊息加以認定。再由骨架與骨架,骨架與支鏈的NOE空間限制得知CTXⅢ的二維結構基本上大致為β - sheet,並與Naja mossambica MOSSAMBICA CXTIIb(Steinmetz et al, 1988 Eur. J. Biochem. 172:101-116)的二維結構相類似。

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