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台灣眼鏡蛇毒磷脂 甲的抗原區域研究
Thesis

台灣眼鏡蛇毒磷脂 甲的抗原區域研究

李茜嵐
Masters, National Tsing Hua University
1986

Abstract

台灣眼鏡蛇毒磷脂 甲抗原免疫化學水解氨基酸 TAIWANCOBRA-TOXINPHOSPHOLIPASEANTIGENIMMUNOCHEMISTRYHYDROLYSISAMINO-ACID
自台灣眼鏡蛇毒中純化出來的磷脂□甲,是由一百二十個胺基酸所構成之內含七個雙硫鍵的單胜□鏈蛋白。張等人在一九八一年對此磷脂□甲作免疫化學研究,發現它至少含有三個抗體結合部位,但是它的抗原決定基至今還未被決定出來。在本研究中,我們分別以胃蛋白□、枯草桿菌蛋白□、酸性蛋白□甲和嗜熱菌蛋白□來對磷脂□甲進行部份水解。水解產物以高壓液相層析儀予以分離,再以酵素免疫法找出具有抗原性的胜□片斷;由胺基酸分析儀所得到的胺基酸組成,比對磷脂□甲的胺基酸排列順序,我們可推知這些具有抗原性的胜□其所在位置,進而找出五個磷脂□可能的抗原區域。因為磷脂□甲僅有的一個甲硫胺酸,剛好位在氮端的第八個位置上,所以我們以溴化氰處理後可得到兩個胜□片斷CBI (氮端八個胺基酸所組成的胜□)和CBⅡ(磷脂□甲除去氮端八個胺基酸所剩下的部份);同時我們也以還原羧甲基化的方法,將磷脂□甲的雙硫鍵打斷。藉由這些修飾後磷脂□甲的免疫研究,發現磷脂□甲至少含有四個抗原決定基,其中兩個是連續性的抗原決定基,而且,氮端八個胺基酸所組成的胜□CBI 是一個連續性抗原決定基的一部份。

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