Abstract
台灣眼鏡蛇毒磷酯 在它的受質存在下, 以乙氧基甲 修飾, 可以發現受質可以保護磷酯 免受修飾而去活化, 但是這個酵素的活性必須副因子鈣離子無法保護它。在沒有受質下修飾酵素, 得到兩種主要的乙氧基甲 化衍生物。經由胺基酸分析及光譜測定, 可知它們各有一個離胺酸受乙氧基甲 化, 二者的活性均只降到原來的30%,但抗原性完全不變。同一酵素亦以甲基化硝基苯磺酸修飾, 三個主要衍生物(a、b、c) 的酵素活性都幾乎全無, 但抗原性以及對鈣離子的結合力均未變。利用差異性光譜來研究酵素的構形如: 原態酵素以及乙氧基甲配化和甲基化衍生物都會因鈣離子的加入而產生擾動形成差異吸收光譜。乙氧基甲 化衍生物(F2 F6) 以及甲基化衍生物(C) 的差異性吸收光譜與原態酵素的相似, 但甲基化衍生物(a及b)的差異性吸收光譜則不具色胺酸受擾動的特性。可能是受修飾後, 當Ca2+結合到色胺酸時, 已無一個可滴定到的基團能除去這種擾動。由差異吸光性飽和度作圖可知, 所有原態與修飾過的酵素均只含一個Ca2+結合位。瑩光光譜的結果亦顯示, 它們只有一個A-NS結合位。PH值會影響Ca2+對ANS 一酵素複合物的作用亦顯示不同PH下, Ca2+會引起不同的構形變化。