Abstract
利用氰酸鉀醯胺化台灣眼鏡蛇結晶毒蛋白來研究自由胺基在毒蛋白中所佔的角色，因氰酸鉀比三—氮基苯硫化物更具親水性，且分子較小，所以用來進行對溶胺酸所扮演的角色，做更進一步的分析。在最初一小時，用醯胺化反應能引起毒性邊速降低，且產生最多之衍生物已被證明其溶氨酸─27為唯一被修飾之胺基酸。雖然毒性下降到38％，但抗原性仍保有88.6％，由此推得溶氨酸─27乃為最易被修飾之自由氨基，且暴露在結晶毒蛋白之分子表面。且此氨基酸可能有助於結晶毒蛋白與受容體結合之進行。當進一步修飾氮端之白氨酸時，結晶毒蛋白衍生物之毒性並不受影響，由此推知氮端之白氨酸並不參與毒蛋白之生理活性，在反應進行二十四小時後，得到的完全甲醯化衍生物只殘餘6％之毒性與 81.6％之抗原性，此結果可印證在已知之三度空間立體結構。得知溶氨基酸─27及47是位於毒蛋白引起毒性之活性表面。其正電性可能促使毒蛋白與受容體結合，或對毒蛋白受容體之錯化合物的安定性，扮演一份重要角色。<end><EOD>編號: 7600937作者: 劉新光作者: Liu, Xin-Guang論文類別: 碩士 指導教授: 楊振忠 指導教授: Yang, Zhen-Zhong 指導教授: 指導教授: 指導教授:學校: 國立清華大學系所: 分子生物研究所年別: 1976篇名: 台灣眼鏡蛇毒磷之酉每甲之化學修飾語言: 中文頁數:摘要: <begin> 台灣眼鏡蛇 (Naja naja atra)毒內之磷脂梅甲經田 CM-Sephadex C-25,DEAE-cellulose層析法及Sephadex G-50膠過濾法予以分離精製。使用電泳集中（electrofocusing ）在酸鹼度四到六的範圍，發現磷脂甲梅有二個相似的梅，成份較多者佔九一．六％。它們的等電位值分別為五．四（主要梅）及四．八（次要梅）。經Sephodex G-50精製後的磷脂梅甲在電氣泳動（electrophoresis）時具單一性。二種不同的磷脂梅甲不能以電氣泳動來區分。以蛋白懸浮液測得主要梅及次要梅的特異活性分別為一．五○○及一．○○○。胺基酸分析顯示他們有相近之組成，藉SDS 膠電泳計算分子量為一四．五○○，由胺基酸組成推算分子量為一三．二○○。半致死量，主要梅為每公斤八毫克，次要梅為每公斤大於三十毫克。一○毫克經Sephadex膠過濾精製的磷脂醃甲與p-bromophenacyl bromid在○．一Ｍ的scdium cacodylote-HC1 緩衝液，酸度六中進行反應四小時後，加入冰醋，停止反應，因SephudexG-25除去試藥後，而後在CM-SphudexC-25上精製，顯示只有一個成份，此成份喪失梅活性且半致死量大於每公斤四○毫克，胺基酸分析顯示一個 histidine殘基被化學修飾。