Abstract
由台灣雨傘節蛇毒中純化出β1-Bungarotoxin (β1Bg+)，利用特異性很高的NBSF(P-Nitrobenzene Sulfonyl fluoride) 對β1-Bg+ 的酪酸加以修飾，再經高壓液相色層分析法將反應後的衍生物分離。經過 基酸分析得知β1-Bg+ 分子十四個酪 酸當中，只有一個選擇性地被修飾、進一步以胰蛋白分解酪 酸被修飾的銜生物，再利用高壓液相色層分析做出其牲汰圖，結果鑑定出唯一被修飾的酪 酸為A 鏈上的Tyr-68。光譜分析滴定法測得Tyr-68酚基的PK值為10.1。Tyr-68被修飾後，β1-Bg+ 的酵素活性及抗原性都沒有改變。但是毒性卻明顯的降低。從Ca2+引發差異光譜試驗及螢光實驗中，發現β1-Bg+ 具有兩個Ca2+的結合位置。當His-48被修飾時，只剩第二個CA2+結合位置，表示第一個CA2+結合位置是位於A 鏈上的酵素活性中心，而第二個CA2+結合位置則可能位在B 鏈上。Tyr-68被修飾後，仍具有兩個CA2+的結合位置，顯示Tyr-68與CA2+的結合無關。無論CA2+存在與否，Tyr-68被修飾的衍生物仍具有與β1-Bg+ 相似的ANS 散射強度，此結果顯示Tyr-68與β1-Bg+ 和其受質之結合無關。