Abstract
在噬菌體 Xp12 所感染的水稻白葉枯病原菌 ( Xanthomonas oryzae pv.oryzae ) 細胞內，我們發現了三個具有 Xp12 特異性的磷酸化蛋白質。這三個磷酸化蛋白質只出現在被 Xp12 所感染的病原菌細胞內，在未被噬菌體感染的病原菌細胞內或為其他噬菌體 (例如噬菌體 Xp10) 所感染的病原菌細胞內均不存在。它們磷酸化的程度隨著 Xp12 得感染，在30-40 分鐘時達到最高，當細胞被 Xp12 溶解後磷酸化即消失。由它們對酸鹼處理與化學抑制劑 hydroxylamine 作用所表現的穩定性，我們推測這三個具有 Xp12 特異性的磷酸化蛋白質均屬於醯基 ( acyl ) 磷酸化蛋白質。它們的分子量分別是 45 (p 45), 28.5 (p 28.5), 和 28 (p28) KD，相對得等電點質為 4.2 與 5.0, 5.4, 和6.0。而此 Xp12 特異性磷酸化作用不但可以利用 ATP 作為磷酸化的基質亦可以 GTP 作為基質，磷酸化反應還需要鎂離子參與作用，但不需要鈣離子。最適合的反應溫度與酸鹼質分別是 37 C 與 pH 7 左右。經由 8-azido [α-P32] ATP光激化標識 ( photo- affinity labeling ) 之結果，我們推測這三個具有Xp12特異性的磷酸化蛋白質本身並不具有蛋白質激脢的活性，而是蛋白質激脢之受質。此外藉由 [S35] methionine 標識 Xp12 蛋白質之結果推測 Xp12 特異性的磷酸化蛋白質應屬於水稻白葉枯病原菌本身的蛋白質。利用 chloramphenicol 對轉錄作用的抑制，我們發現 Xp12 特異性磷酸化作用需要蛋白質合成得參與，這個結果顯示 Xp12 特異性磷酸化需要至少一個以上新和成的蛋白質激脢參與作用，而暗示 Xp12 特異性磷酸化蛋白質激脢可能是由噬菌體的蛋白質所扮演。在更進一步得研究中，我們發現 Xp12 特異性磷酸化作會被 rifampicin 抑制，但是這個抑制現象在水稻白葉枯病原菌抗 rifampicin 自然突變株細胞內不會發生。這些自然突變株細胞內 RNA 聚和脢對 rifampicin 的鍵結能力低於野生株，但是rifampicin 對磷酸化得抑制現象並非發生在抑制磷酸化蛋白質激脢或激脢受質之轉譯作用上。而從抑制劑作用的結果推測認為這種現象的可能造成因素和 rifampicin 與細胞 RNA 聚和脢在鍵結之後所引起的細胞核質(nucleoid) 結構鬆散現象有關