Abstract
本論文係以色胺酸最終合成路徑上前兩個酵素ASase及PRTase的結構基因TrpED為研究主要對象,探討TrpED基因表現及色胺酸代謝路徑上瓶頸之解除、轉移等問題。在基因調控上,由色胺酸基因調控數學模式之結果可知,當色胺酸抑制子濃度低時,色胺酸基因組基因表現的效率較好,且藉由基因量的增加,可降低色胺酸抑制子的抑制作用。在實驗上亦証實基因量的增多及色胺酸抑制子的去除,的確能有效增加基因的表現。但在基因大量表現的同時,也造成菌體生長速率變慢,及易發生質體不穩定的現象。另由實驗結果知,在宿主ED102中,ASase雖經質體放大、甚至去除色胺酸的回饋阻害,然仍未解除其在色胺酸生合成路徑上主要瓶頸的地位。在ED24/pETAED-SRl中,藉由色胺酸抑制子之去除、TrpE基因的改造及質體的放大,原為色胺酸代謝合成瓶頸的ASase步驟已被解除,而在其下游的步驟上形成新的瓶頸。