Abstract
在我們先前的研究裡，成功的從中藥梔子果實中，萃取純化出一天然交聯劑genipin，其細胞毒性與生物相容性皆明顯的比傳統交聯劑glutaraldehyde（GA）來得好。近年來，我們亦發現梔子果實中，有另一可能的交聯劑aglycone geniposidic acid（aGSA）。本研究擬萃取純化此交聯劑，並探討其交聯生物組織與chitosan後的各項性質。 本研究分為兩大部分來進行。第一部份的實驗裡，我們探討了aGSA的萃取純化過程，並利用HPLC、FT-IR及NMR證明該物質的結構。接著將此純化出來的aGSA，在不同pH值的緩衝溶液下，與生物組織交聯，並測量其交聯指數與變性溫度，以探討aGSA在不同pH值下對生物組織的交聯能力。第二部份的實驗裡，我們探討了以aGSA交聯chitosan薄膜的交聯指數、膨潤度、機械性質及抗酵素分解等性質，並做其細胞相容性的測試。 第一部分的實驗結果顯示，我們成功的從梔子果實裡萃取出geniposide（GS），利用皂化及水解反應生成aGSA，並以層析技術分離純化出aGSA。生物組織交聯性質測試結果顯示，aGSA在中性溶液及在鹼性溶液中，具有較高的交聯程度。由於中性溶液為溫和且符合人體生理環境，因此，我們選用中性溶液來做之後的chitosan薄膜交聯測試。 第二部份的實驗結果顯示，aGSA具有比 GA更好的交聯能力。然而當交聯劑濃度過高時，chitosan薄膜會產生過度的交聯，使得薄膜產生脆化的現象。在抗酵素分解實驗裡，以aGSA交聯的chitosan薄膜（aGSA薄膜）具有較好的抗酵素分解能力，GA交聯的chitosan薄膜（GA薄膜）次之，而未經交聯的chitosan 薄膜（Fresh薄膜）其抗酵素分解能力則較差。在細胞相容性方面，Fresh薄膜與aGSA薄膜擁有較佳的細胞相容性，且明顯要比GA薄膜來的好。此結果顯示aGSA具有比GA更好的細胞相容性。 在反應機制部分，經由FT-IR、UV吸收光譜、多侖與斐林試劑以及NMR的證明顯示，aGSA與genipin可能具有相同的反應機制：生物組織或chitosan的自由胺基會對aGSA上3號位置的碳原子做親核攻擊，使得aGSA開環，而形成具有醛基的中間產物，此醛基再與接上的2級胺反應，變成類似pyridine的結構，進而聚合成為大分子的藍紫色產物。 綜合以上的實驗結果，我們成功的萃取純化出aGSA，且經由各項的交聯性質探討後證實，aGSA比起傳統交聯劑GA，具有更好的交聯能力與細胞相容性。